产品货号：
HR8042
中文名称：
花粉蛋白提取试剂盒
英文名称：
Pollen protein extraction kit
产品规格：
50T|100T
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
简要说明：
产品特点：
产品应用：
产品组成：
保存：2～8℃，其中蛋白酶抑制剂置于-20℃，有效期1年。
保存事项：
用户自备：
注意事项：
使用方法：
常见问题：
相关搜索：花粉蛋白提取试剂盒，Pollen protein extraction kit
本试剂盒提供全套试剂，适用于从各种花粉样本中提取总蛋白，提取过程简单方便。本试剂盒含有的独特配方能够有效溶解细胞膜组分。本试剂盒含有的蛋白酶抑制剂混合物，阻止了蛋白酶对蛋白的降解，为提取高纯度的蛋白提供了保证。
产品特点：
- 本试剂盒提取的蛋白为具有天然蛋白构象的活性蛋白。
- 本试剂盒中不含有EDTA，与金属螯和层析等下游应用兼容。
产品应用：
本试剂盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白质电泳、免疫沉淀、ELISA、转录活性分析、Gel shift凝胶阻滞实验、酶活性测定等下游蛋白研究实验。
产品组成：
| 组分 | 50T | 100T |
| 组分A：花粉总蛋白提取液A | 25mL | 50mL |
| 组分B：蛋白稳定剂B | 200μL | 400μL |
| 组分C：蛋白酶抑制剂混合物C | 100μL | 200μL |
保存：2～8℃，其中蛋白酶抑制剂置于-20℃，有效期1年。
保存事项：
- 蛋白酶抑制剂未开盖使用前也可以2～8℃储存。开盖使用后-20℃储存。
- 蛋白酶抑制剂在2～8℃低温时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
- 有效期为试剂盒未拆封前按要求条件保存的有效期，试剂拆封后请尽快使用完。
用户自备：
- 仪器准备：离心机、振荡器、匀浆机/匀浆器、涡旋混匀器、移液器、冰箱、冰盒。
- 试剂准备：1×PBS缓冲液、蛋白定量试剂盒。
- 耗材准备：离心管、吸头、一次性手套。
注意事项：
- 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
- 蛋白酶抑制剂在2～8℃时是固体状态，从冰箱取出后恢复至室温或37℃短时间水浴，变成液体状态后离心至管底部再开盖。
- 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。
- 蛋白酶抑制剂储存期间溶液如果出现沉淀，不影响使用，溶解后正常使用。
- 如果试剂盒不能短时间内用完，蛋白酶抑制剂混合物不可以一次全部加入提取液。
- 可以根据自己实验需要加入其它蛋白酶抑制剂单品。
- 下游实验如果是进行特定蛋白酶或磷酸酶的酶活性检测，提取液可以不加蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，注意提取过程保持低温操作，缩短离心时间。
使用方法：
- 提取液准备：每500μL冷的提取液A中加入4μL蛋白稳定剂和2μL蛋白酶抑制剂，混匀后置冰上备用。
- 用PBS洗涤花粉一次。
- 每50～100mg花粉样本中加入500μL提取液A，充分混匀。
- 在冰浴条件下超声，功率300-400w，3分钟超声，3分钟间隔，重复10次。
- 将提取液在4℃振荡15～20分钟。
- 在2000×g离心10分钟，弃沉淀，收集上清。
- 将上清在4℃，14000×g条件下离心10～15分钟，弃沉淀。
- 将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到花粉总蛋白。
- 上述蛋白提取物请分装后于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。
常见问题：
- 蛋白浓度低？
处理部分组织样本时可能没有裂解完全，导致蛋白浓度低。只要适当延长试剂A的处理时间即可。最好在持续振荡的条件下处理，没有振荡器也可间隔几分钟用吸头吹打混匀。 - 用什么方法定量蛋白？
建议用BCA法。不适合用Bradford法，因为试剂A中含有干扰Bradford法的组分，导致定量不准。如果已经进行过透析处理或者用脱盐柱改换过缓冲体系，则可以用Bradford法定量。 - 提取的蛋白具有活性吗？
本试剂盒不含有离子型去垢剂组分，不破坏蛋白的结构，没有对蛋白质之间原有的相互作用的破坏，蛋白均保持其天然构象和活性。
相关搜索：花粉蛋白提取试剂盒，Pollen protein extraction kit